SacI (10 U/µL)
Description
5′ | G | A | G | C | T ↓ | C | 3′ | ||||
3′ | C | T | C | G | A | G | 5′ |
Thermo Scientific SacI restriction enzyme recognizes GAGCT^C sites and cuts best at 37°C in its own unique buffer. Voir Conditions de réaction pour les enzymes de restriction pour un tableau de l’activité enzymatique, des conditions de double digestion et de l’inactivation thermique pour cette enzyme et d’autres enzymes de restriction. Remarque: Également disponible en tant qu’enzyme FastDigest pour une digestion rapide de l’ADN. Isoschizomères: Eco53kI, EcoICRI, Psp124BI, SstI.
Les endonucléases de restriction conventionnelles Thermo Scientific sont une vaste collection d’enzymes de restriction de haute qualité, optimisées pour fonctionner dans l’un des tampons du système Five Buffer. De plus, le tampon Tango universel est fourni pour plus de commodité dans les doubles digestions. Toutes les enzymes présentent une activité de 100% dans les conditions de tampon et de réaction recommandées. Pour garantir des performances constantes, les tampons de réaction enzymatique de restriction Thermo Scientific contiennent du BSA prémélangé, qui améliore la stabilité de nombreuses enzymes et lie les contaminants pouvant être présents dans les préparations d’ADN.
Caractéristiques
* Qualité supérieure – contrôle de qualité rigoureux et processus de fabrication de pointe dans l’industrie
* Système de tampon à cinq couleurs pratique
* Comprend un tampon Tango universel pour les doubles digestions
• Tampons de réaction prémélangés BSA
• Large sélection de spécificités de l’endonucléase de restriction
Applications
• Clonage moléculaire
• Cartographie du site de restriction
• Génotypage
• Southern blot
• Polymorphisme de longueur de fragment de restriction (RFLP)
* SNP
Remarque: SacI est sensible à la méthylation de la cytosine au GAGmCTC, mais pas au GAGCTmC et insensible à la méthylation de l’adénine au GmAGCTC. La méthyltransférase AluI (AGmCT) peut être utilisée pour bloquer les SacI. Les plasmides suralimentés peuvent nécessiter jusqu’à 5 fois plus de SacI pour une digestion complète que l’ADN linéaire. SacI est inhibé par les anticoagulants cliniques courants présents dans certaines préparations de sang périphérique anticoagulé et de moelle osseuse. Il a été démontré que les niveaux d’EDTA et d’ACD (acide citrique – citrate de sodium – dextrose) dans la préparation d’échantillons standard inhibent le SacI. Trois fois la concentration normale d’héparine est nécessaire pour inhiber SacI. (J. E. Coad et coll., Inhibition des endonucléases de restriction par des anticoagulants cliniques courants. Anal. Biochem. 205, 368-369, 1992). Pour la sensibilité à la méthylation, reportez-vous aux spécifications du produit.