Description

Thermo Scientific SacI restriction enzyme recognizes GAGCT^C sites and cuts best at 37°C in its own unique buffer. Zie Reactiecondities voor restrictie-enzymen voor een tabel met enzymactiviteit, voorwaarden voor dubbele spijsvertering en warmte-inactivatie voor deze en andere restrictie-enzymen. Opmerking: ook verkrijgbaar als fastdigest enzym voor snelle DNA spijsvertering. Isoschizomers: Eco53kI, EcoICRI, Psp124BI, SstI.Thermo Scientific conventional restriction endonucleases zijn een grote verzameling van hoogwaardige restrictie-enzymen, geoptimaliseerd om te werken in een van de buffers van het Vijfbuffersysteem. Bovendien is de universele Tangobuffer voorzien voor het gemak in dubbele digesties. Alle enzymen vertonen 100% activiteit in de aanbevolen buffer-en reactieomstandigheden. Om consistente prestaties te garanderen, bevatten Thermo Scientific restriction enzyme reaction buffers voorgemengd BSA, wat de stabiliteit van veel enzymen verbetert en contaminanten bindt die aanwezig kunnen zijn in DNA-preparaten.
eigenschappen
* superieure kwaliteit-strenge kwaliteitscontrole en toonaangevend productieproces
* handig Vijfbuffersysteem met kleurcodering
* inclusief universele Tangobuffer voor dubbele digesties
• BSA voorgemengd in reactiebuffers
* Brede selectie van specifieke restrictie-endonuclease
Toepassingen
* moleculair klonen
* beperking plaats mapping
* genotypering
* Southern blotting
* Restriction fragment length polymorphism (RFLP)
* SNP
Note: SacI is gevoelig voor cytosine methylering bij GAGmCTC, maar niet gagctmc en ongevoelig voor adenine methylering bij GmAGCTC. Alui methyltransferase (AGmCT) kan worden gebruikt om SacI te blokkeren. Supercoiled plasmiden kunnen tot 5-voudig meer SacI voor volledige spijsvertering dan lineair DNA vereisen. SacI wordt geremd door veelvoorkomende klinische anticoagulantia die worden aangetroffen in sommige preparaten van anticoagulerend perifeer bloed en beenmerg. De spiegels van EDTA en ACD (citroenzuur-natriumcitraat-dextrose) in de standaard monstervoorbereiding bleken SacI te remmen. Drie keer de normale concentratie voor heparine is nodig om SacI te remmen. (J. E. Coad et al., Remming van restrictie-endonucleasen door gemeenschappelijke klinische anticoagulantia. Anaal. Biochem. 205, 368-369, 1992). Voor methylatiegevoeligheid, raadpleeg productspecificaties.