az Acinetobacter baumannii (A. baumannii) kórházi szerzett fertőzéseket (hai) okoz, mint például a lélegeztetőgéphez kapcsolódó tüdőgyulladás, bakterémia, húgyúti fertőzések , meningitis és sebészeti sebfertőzések, ami a betegek növekvő mortalitásához vezet. Ezeknek a fertőzéseknek a kockázati tényezői közé tartozik a mechanikus szellőzés, a széles spektrumú antibiotikumok használata, az ICU tartózkodási ideje és a kóma . Statisztikailag évente körülbelül 1 000 000 ember fertőződött meg világszerte az A. baumannii – val, és ezeknek a fertőzéseknek a felét multirezisztens (MDR) törzsek okozták . Az A. baumannii fertőzés halálozási aránya az ICU-ban 45~60% volt, még akkor is elérte a 84,3% – ot, amikor a betegeket kiterjedt gyógyszerrezisztencia (XDR) A. baumannii fertőzte meg . 2017-ben karbapenem-rezisztens A. a WHO által kiadott gyógyszerrezisztens baktériumok listája szerint a baumannii (rák) az első helyen áll az emberi egészséget fenyegető veszélyek és a releváns antibiotikumok kifejlesztésének sürgőssége szempontjából .

azonban a kolisztin (CST) és a tegaciklin, a karbapenemáz-termelő GNB elleni leggyakrabban használt antibiotikumok hatástalanná váltak az antibiotikum-rezisztencia miatt . A klinikai hatékonyság elérése érdekében az orvosoknak növelniük kellett a CST adagját, és tegaciklinnel kombinálniuk kellett . Sajnos a rák és az XDR-a által okozott bakterémia és súlyos légúti fertőzések esetén. baumannii illetve a kombinációs terápia még mindig nem működött hatékonyan . A súlyos bakteriális rezisztenciával szemben a kutatók rájöttek, hogy sürgősen új antibakteriális stratégiákat kell kidolgozni, nem pedig a hagyományos antibiotikumokra támaszkodni.

általában kétféle módon lehet új antimikrobiális szereket tervezni. Az egyik a baktériumok túléléséhez nélkülözhetetlen anyag termelésének gátlása ; a másik a patogén baktériumok virulencia faktorainak vagy antibiotikum-rezisztencia génjeinek gátlása a patogenitás elnyomása vagy az antibiotikumokkal szembeni érzékenységük javítása érdekében . Az egyetlen esszenciális összetevő gátlása azonban elkerülhetetlenül nagy evolúciós nyomást gyakorol a baktériumokra, és elősegíti a magas szintű gyógyszerrezisztens törzsek kialakulását . Ezért az új beavatkozási stratégia, amely a nem esszenciális folyamatokat célozza meg, a kulcs a baktériumok leküzdéséhez rezisztencia . Például az AbaI/AbaR kvórumérzékelő rendszerek gátlása természetes vagy szintetikus inhibitor szerrel blokkolja a baktériumok közötti kommunikációt és gátolja a biofilmek képződését . A baktériumok fontos virulencia tényezőinek osztályaként a külső membránfehérjék (OMP) sokkal nagyobb figyelmet szenteltek.

Az Om-k az OM-ben horgonyzott egyedi integrált membránfehérjék egy csoportja, amelyek 6-26 szálból álló, hosszú csövű szerkezeteket alkotnak. Az extracelluláris oldalon lévő szálak között Nagy, meghosszabbított hurkok vannak, a periplazmikus oldalon pedig rövid hurkok. Ezek a tulajdonságok biztosítják az OMP-k nagy stabilitását a membránban és a rendkívül zord környezetek elleni küzdelem képességét . Bár a különböző OMP-k különböző szekvenciákkal és funkciókkal rendelkeznek, hasonló szerkezettel és biológiai tulajdonságokkal rendelkeznek . A baktériumok OMP-je páros számú szálakból áll, és fontos, hogy a funkció és az állvány nyírási száma a szekvenciáiktól függ. Például virulenciához kapcsolódó fehérjékként az E. coli-ban a komplementkötő OmpX fehérje, a Yersinia pestis – ben pedig a fibronektin-és heparin-kötő fehérje Ail hasonló szerkezettel rendelkezik, de szekvenciaazonosságuk 45% – nál alacsonyabb volt. Az OMP-szekvenciák sokfélesége az N-terminálon lényegesen nagyobb, mint a C-terminálon, és a konzervált ons jel vezérli az OMP-k összecsukását és helyes összeszerelését .

mindeddig azonban az A. baumannii-ban található OMP-k típusait nem sikerült egyértelműen azonosítani, és csak néhány szétszórt jelentés állt rendelkezésre, főként a BamA, az LptD, az Omp33–36, Az OmpW. CarO és OprD. Maga a BamA, mint OMP, automatikusan beilleszthető az OM-be, és felelős a többi OMP összeállításáért ; Az LptD közvetíti az LPS szállítását a külső membránhoz (OM), amelynek elvesztése az intermedierek felhalmozódását és az LPS hibahelyét okozhatja, és végül a bakteriális membrán integritásának megzavarásához vezethet ; az Omp33–36 a víz áthaladásának csatornája, amely a kaszpáz aktiválásával és az autofágia szabályozásával indukálhatja a gazdasejtek apoptózisát ; az OmpW egyfajta hidrofób porin, amely az OM-ban és a citoplazmában létezik, és fontos szerepet játszik a vasion homeosztázisának modulálásában a baktériumokban ; a CarO és az OprD a víz áthaladásához kapcsolódik; az Omp33-36 a a karbapenem ellenállása .

Az a OMP-k között. baumannii, az OmpA a legmélyebben tanulmányozott virulencia faktor, amely kulcsszerepet játszik az A. baumannii adhéziójának, agresszivitásának és biofilmképződésének szabályozásában és a gazdaszervezet immunválaszában. Az OmpA túltermelése független kockázati tényező az A. baumannii által okozott nozokomiális tüdőgyulladás és bakterémia halálozási arányában . Ezenkívül a QRT-PCR-rel mért OmpA expressziós szintje gyors diagnosztikai indexként használható az antibiotikum-rezisztens A. baumannii esetében, amellyel az eredmények nagymértékben összhangban vannak a hagyományos MIC-elemzéssel.

Ez az áttekintés áttekintette az AbOmpA szerkezetét, funkcióját és patogenezisét, összefoglalta az Abompát célzó terápiás stratégiákat, és kiemelte, hogy az AbOmpA miért potenciális célpont az A. baumannii kezelésében.

OmpA szerkezet és funkció

az OmpA-t először 1974-ben azonosították hőmódosítható fehérjeként az Escherichia coliban (E. coli), és eredetileg 1977-ben tisztították. Molekulatömege 28 kDa-tól 36 kDa-ig terjed . Az OmpA család a felületnek kitett, porin fehérjék csoportja, magas példányszámmal a GNB OMP-jében. Az OmpA N-terminális doménje egy antiparallel 6-hordó szerkezet, amely nyolc transzmembrán szálból áll, hogy beágyazódjon a külső membránba. A nyolc szálat négy hosszú hurok köti össze a külső membrán felületén, valamint három rövid fordulat periplazmikus doménben, amely gömb alakú C-terminált képez . Még egy specifikus baktériumtörzsben is, az OmpA aminosav-szekvenciái különbözőek több alosztály között .

az elmúlt években az AbOmpA natív szerkezetének tisztázásával a kutatók azt találták, hogy az abompa aminosavai különféle klinikai izolátumokból erősen konzerváltak (> 89%), miközben nem homológ az emberi proteomhoz . Különböző OmpA-szerű fehérjék összehasonlításával azonosították a két konzervatív aminosavat, az R286-ot és az Asp271-et, amelyek az OmpA C-terminális doménjében találhatók. Mindkét aminosav nem kovalensen kötődik a diaminopimelát aminosavhoz (DAP), a peptidoglikán (PGN) egyik komponenséhez . Ez az interakció arra utal, hogy az OmpA kulcsszerepet játszik a baktériumok felületi integritásának fenntartásában. Általában a GNB fajokban az OmpA öndimerizációval stabilizálja a szerkezetüket, ami megakadályozza a hajlító kapcsolatok lizálását a periplazmikus és a hosszú csövű szerkezet között .

az AbOmpA elengedhetetlen ahhoz, hogy az A. baumannii tapadjon és behatoljon a hámsejtekbe

A. a baumannii képes belépni a gazdasejtekbe és megmaradni bennük. Először a gazdasejtekhez tapad, majd behatol és transzlokálódik a sejtmagba. A gazdasejtek elpusztítása után terjed a véráramban és a szövetekben . Az AbOmpA közvetíti az A. baumannii epiteliális sejtekhez való tapadását és invázióját (ábra. 1A, felső panel). A vad típusú baktériumokkal összehasonlítva az izogén AbOmpA-mutáns törzs nehezebb behatolni a gazdasejtekbe. A rekombináns Abompával (rAbOmpA) történő előzetes inkubálás drámai módon gátolja az erősen invazív A. baumannii 05ka103 epiteliális sejtekhez való tapadását és invázióját. In vivo a patogenezist késlelteti az AbOmpA mutációja, mivel a bizonyítékok azt mutatták, hogy az egér tüdőgyulladás modelljének kevesebb bakteriális terhelése van a vérben . Az OmpA tapadási mechanizmusához Smani et al. megállapították, hogy az A. baumannii számára könnyebb volt a fibronekcióval bevont 96 lyukú lemezeket rögzíteni, mint a BSA-val bevont lemezeket, és megállapították, hogy a fibronekcióval való fehérjekötődés az OmpA, ami azt jelzi, hogy az OmpA firbronektinhez való kötődése volt az első lépés az A. baumannii és a gazdasejtek közötti kölcsönhatásban.

az OmpA funkciói A. baumannii-ban. egy felső panel. A hámsejtekkel való érintkezés során a baktériumok titkosítják az OmpA-t ezekbe a sejtekbe. Az OmpA képes transzlokálni a sejtmagban és a mitokondriumokban, és stimulálja a mitokondriumokat a citokróm c felszabadítására. ezután a citokróm c elősegíti az apoptózist indukáló faktor (aif) transzlokációját a sejtmagba, végül az epiteliális sejtek apoptózisát okozza. Alsó panel. Az OmpA növeli a nitrogén-monoxid-szintáz (iNOS) termelését és a Toll-szerű receptor 2 (TLR2) felszíni expresszióját a hámsejtekben, mindkettő kiváltja a gazdasejt halálát. B alacsony koncentrációban az OmpA aktiválja a DCs-t, amely stimulálja a CD4+T-sejteket a Th1 válasz kifejtésére, míg magas koncentrációban; Az OmpA megöli a DC-ket azáltal, hogy mitokondriumokat indukál a ROS felszabadítására. a c AbOmpA megállíthatja a szérum h faktort a szérumban, ami a komplement válasz bénulását okozza. a d AbOmpA domináns szerepet játszik az abiotikus felületek rögzítésében és a biofilm mátrix kialakításában. e az AbOmpA egy porin fehérje, amely a külső membránon helyezkedik el, szelektíven lehetővé téve a kis molekuláris vegyületek áteresztését

az AbOmpA közvetlenül a gazdasejtek halálát okozhatja, ha a gazdasejtekbe a külső membránhólyagokon (OMV-k) keresztül szállítják . Amint az ábrán látható. 1a, miután belépett a gazdasejtekbe, az AbOmpA lokalizálódhat a mitokondriumokba, ami molekulák felszabadulásához vezet (például citokróm C, apoptózist indukáló faktor (aif)) az A. baumannii fertőzés korai szakaszában, az AIF lebontja a kromoszóma DNS-t és megkönnyíti a hámsejtek apoptózisát . Ezenkívül az OmpA transzlokálhat a gazdasejtek magjába is, a monopartit nukleáris lokalizációs jelétől (NLS) függően-“KTKEGRAMNRR”, amely az OmpA 320 és 330 maradékai között helyezkedik el. A rAbOmpA szubcelluláris célzása indukálhatja a gazdasejtek apoptózisát, de a specifikus mögöttes mechanizmus nem egyértelmű . az A. baumannii ATCC19606-ból tisztított rAbOmpA 6 ~ g/mL koncentrációban elegendő ahhoz, hogy citotoxicitást fejtsen ki az emberi gége epitheliális HEp-2 sejtjeire . Az AbOmpA elősegíti, hogy az A. baumannii a gazdasejtekhez tapadjon és behatoljon, ami a mitokondriumokban és a sejtmagban lokalizálódva halálukhoz vezet, de hogy az AbOmpA más organellákban működik-e, azt még meg kell vizsgálni.

az AbOmpA stimulálja a veleszületett immunválaszt

az AbOmpA a gazdaszervezet immunrendszerét is befolyásolja. Bár az AbOmpA-kezelés nem befolyásolja a gyulladásgátló citokinek vagy kemokinek expressziós szintjét, növeli a nitrogén-monoxid-szintáz (iNOS) termelését és a Toll-szerű receptor 2 (TLR2) felületi expresszióját a HEp-2 sejtekben (ábra. 1A, Alsó panel). Mindkettő fontos a gazda-védelmi mechanizmusban. A nitrogén-monoxid (NO) bakteriosztatikus és baktericid funkciókat fejt ki a tüdőfertőzésben , és ez az oxidatív stressz egy másik ok-okozati tényező a sejthalálhoz. A TLRs felismeri a kórokozókkal összefüggő molekuláris mintákat (PAMPs), és immunválaszt vált ki . Az AbOmpA csontvelőből származó dendritikus sejtekre (DCS) gyakorolt hatását az ábra szemlélteti. 1b. az AbOmpA 200 ng/mL koncentrációban aktiválja a DCs – t a TLR2, MAPK és NF-kB útvonalon keresztül, stimulálva a CD4+T-sejteket a Th1 válasz felé . Az AbOmpA azonban hajlamos a DC-k elpusztítására magas koncentrációban (3 ~ g/mL) a mitokondriumokból származó reaktív oxigénfajok (ROS) növelésével . A rAbOmpA-val történő oltás stype 2-es immunválaszt indukálhat egerekben, ami megrongálta az IL-4 és az INF-c közötti egyensúlyt, és fertőzés kialakulásához vezetett . Ezenkívül az AbOmpA megbénította a komplement válaszrendszert a szérum H Faktor leállításával (ábra. 1c).

az AbOmpA biofilmképződést indukál

a Biofilm lehetővé teszi az A. baumannii számára , hogy ellenséges körülmények között túlélje, főleg fehérjékből, extracelluláris DNS-ből és poliszacharidokból áll. A National Institutes of Health és a Center for Disease and Prevention statisztikái szerint az emberi fertőzések 65-80%-át biofilmképző baktériumok okozták . A biofilmképződés multifunkcionális jellemzői alapján a bakteriális adhézióval és a biofilmképződéssel összefüggő gének sorozatát azonosították, mint például az AbOmpA, a béta-laktamáz PER-1 (blaPER-1) és a biofilmhez kapcsolódó fehérje (Bap) . Valójában az A. baumannii Atcc19606 OmpA domináns szerepet játszik a stabil biofilm kialakításában a műanyag felületen (ábra. 1d). Az AbOmpA mutáns törzsek nem képesek biofilmet képezni, míg az AbOmpA allél feltöltése hatékonyan helyreállítja a képességet .

kis molekulájú antibiotikumok áteresztése az AbOmpA-n keresztül

a Porinok csak a GNB külső membránjában található hosszú csövű fehérjék. Az AbOmpA a gyógyszerrezisztencia, a hámsejtek kötődésének és a biofilm képződésének leggyakoribb porinja . Smani et al. először igazolták az AbOmpA hatását a multirezisztens A. baumannii fenotípusára, és megállapították, hogy az OmpA gén kimerülése a kloramfenikol, aztreonam és a nalidixic Mic-jét 8, 8 és 2,67-szeresére csökkentette. Ezek az adatok arra utaltak, hogy az OmpA részt vehet az antibakteriális vegyület extrudálásában a periplazmikus régióból, és párosítható a belső membrán efflux rendszereivel . A porinok által vezérelt transzmembrán transzport fontos módja a tápanyagok és a kis molekuláris hidrofil antibakteriális vegyület baktériumokba juttatásának . Ramkumar et al. megállapította, hogy az AbOmpA szelektíven lehetővé tette a kis molekuláris antibiotikumok átjutását (ábra. 1e). Például az ETX2514, a széles spektrumú laktamáz inhibitor, behatol az Abompán keresztül, és AbOmpA-függő módon fokozza a szulbaktám antibakteriális aktivitását. A jövőben az AbOmpA kristályszerkezet tisztázása feltárja a szubsztrát, a porin fehérje és a permeáció előzetes szerkezete közötti kapcsolatot, több információt nyújtva a kis molekuláris szubsztrát tervezéséhez .

az AbOmpA expresszió szabályozása

a GNB közül az OmpA expressziót befolyásoló tényezőket leginkább az Escherichia coli jellemzi, mint például a tápanyagok, a tenyésztési feltételek, a bakteriofág fertőzés és a metabolikus enzimek . Az A. baumannii OmpA-szabályozó mechanizmusait azonban még vizsgálják. Bár az OmpA a GNB-ben hasonló kétrészes szerkezettel rendelkezik, a baktériumok külső felületén elhelyezkedő aminosavszekvenciák különbözőek a különböző nemzetségek között . Az E. coli tanulmányaiból való tanulás mellett az A. baumannii OmpA jellemzőit is fel kell tárnunk. Az elmúlt években kimutatták, hogy az AbOmpA stresszel összefüggő külső membránfehérje, amelynek expresszióját a baktériumok belső és külső környezete befolyásolja . A hőmérséklet, a szárazság és a tápanyaghiány hatásainak tanulmányozása során az atcc19606 érzékeny törzs és a klinikai izolátumok hosszú távú túlélésére, Bravo Z et al. megállapította, hogy az adhézióval és a biofilmképződéssel kapcsolatos gének, az OmpA, a bfmR és a csuAB mind le vannak szabályozva az éhező sejtekben, ami nehézségeket okoz a biofilmek kialakításában és az A. baumannii terjedésében a vérben . A Hfq fehérje, az E. coi-ban először felfedezett host bakteriális faktor elengedhetetlen a QB bakteriofág RNS szintéziséhez, és most a stresszre adott válaszokkal kapcsolatos transzkripciós szabályozónak tekintik. A Hfq hiány lassítja a sejtek növekedését és fokozza a sejtek érzékenységét a környezeti stresszre. Az OmpA expressziós szintje a Hfq mutáns törzsben drámaian alacsonyabb, mint egy vad típusú törzsben . Ezenkívül ok-okozati összefüggés van a biofilm képződés és az AbOmpA expresszió között az A. baumannii-ban az antibiotikumok minimális gátló koncentrációnál (Mic) történő kezelése során. Josinori és munkatársai. atcc19606 és klinikai izolátumokat inkubáltunk 1/2 MIC polimixin B-vel (PMB) és kolisztinnel (CST) 24 órán keresztül, és azt találtuk, hogy pozitív korreláció van az abompa mRNS szintje és a biofilm sejtek száma között a CST-vel kezelt ATCC19606 törzsben. Ugyanezeket az eredményeket figyelték meg az R3 klinikai izolátumokban PMB jelenlétében . A Meropenem 64, illetve 128, 6 g/mL koncentrációban 1,81, illetve 1,63-szorosára növelte az AbOmpA expressziót .

összességében három tényező van, amelyek elsősorban az abompa szabályozásában vesznek részt a legújabb tanulmányokban. Először is, a hátrányos helyzetű környezetek, mint például az éhezés, csökkenti az AbOmpA termelését, megnehezítve az A. baumannii számára a biofilm képződését és a gazdasejtekhez való tapadást; másodszor, a hfq, egy transzkripciós szabályozó, amelynek expressziós szintje szorosan kapcsolódik az AbOmpA szintjéhez; végül néhány antibiotikum a sub-MIC-ben elősegíti az AbOmpA expresszióját és a biofilm képződését. Bár számos tényezőt bizonyítottak az A. baumannii OmpA expresiójával kapcsolatban, a mögöttes mechanizmusokat még fel kell tárni.

az AbOmpA-t célzó terápiás stratégiák

polipeptid

manapság a szintetikus kis polipeptid, amely specifikusan kötődik az OmpA-hoz, úgy tervezték, hogy megakadályozza az A. baumannii érintkezését a gazdasejtekkel. Az AOA-2, egy ciklikus hexapeptid, mint az abompa baktericid hatás nélküli blokkoló szer, csökkenti az A. baumannii, Pseudomonas aeruginosa és E. coli tapadását a biotikus és abiotikus felületekhez, és jelentősen növeli az A. baumannii érzékenységét a CST-vel szemben 125 6G/mL koncentrációban. In vivo az AOA-2 (10 mg/kg) intraperitoneális injekciója CST-vel (10 mg/kg) kombinálva 20% – kal javította a bacteraemiás egerek túlélési arányát . Ezenkívül fokozatosan felfedezték az AbOmpA-val kölcsönhatásba lépő klasszikus antimikrobiális peptideket (amp-ket), amelyek endogén védelmi peptidek sorozata a baktériumok és a gombák elpusztítására . Például a szarvasmarha mieloid antimikrobiális peptid (BMAP-28) és analóg peptidjei az ABOMPA-val való kölcsönhatás révén megölték az MDR-A. baumannii-t. Ezek a vegyületek elkezdték elpusztítani a-T. baumannii 40 db / ml koncentrációban mindössze 15 percen belül, majd 30 perc elteltével a baktériumsejtek nyilvánvalóan károsodtak a szivárgó citoplazmában . Ezenkívül az LL-37 dózisfüggő módon kölcsönhatásba lépett az AbOmpA 74-84 aminosavmaradékaival, csökkentve az A. baumannii adhézióját a gazdasejtekhez. Az LL-37 adhézióra gyakorolt gátló hatása azonban az AbOmpA deléció után jelentősen csökkent . Az emberi defensing-5 (HD5) egy endogén peptid, amely megöli az MDR-A. baumannii-t. A HD5 antibakteriális aktivitásának fokozása érdekében a nem kationos és nem hidrofób maradványokat pozitív töltésű argininnel helyettesítettük, hogy egy HD5d5 nevű származékot kapjunk, amely erősen kötődik az AbOmpA-hoz, majd kifejti toxin-semlegesítő funkcióját . Bár bizonyíték van arra, hogy az MDR-Staphylococcus aureus katabolikus enzimek előállításával rezisztens az LL-37-re , nem számoltak be arról, hogy az A. baumannii képes-e rezisztenciát kialakítani a természetes erősítőkkel szemben. A szintetikus kis peptid, amely kifejezetten a baktericid hatás nélküli Abompát célozza meg, elkerülheti a bakteriális evolúciós nyomás kiváltását, és önmagában vagy más antibakteriális vegyületekkel kombinálva szinergikus hatást fejthet ki.

vakcina

a vakcina ideális antigénjeként az AbOmpA különféle klinikai törzsek között konzerválódik, amelyek genomja eltér az emberi genomtól . Luo G és mtsai. megállapította, hogy az egerek immunizálása 3 6G rOmpA-val 0,1% alumínium-hidroxidban (Al (OH)3) jelentősen javította az A által fertőzött cukorbeteg állatok túlélési arányát. a baumannii HUMC1 40%-kal, és a kontrollhoz képest tízszeresére csökkentette az összes szerv (kivéve a tüdőt) baktériumtelepeinek számát. Ezenkívül a szérumban a rOmpA elleni IgG antitest is drámaian megnőtt . Badmasti F et al. kimutatták, hogy az ATCC19606 által indukált disszeminált szepszisben szenvedő egerek túlélési aránya figyelemre méltóan javult (70%) az AbOmpA rekombináns konzervált immunodomináns régiójával (8-346aa) történő kezelés után, továbbá a Bap-val(1-487aa) történő kombináció szintén növelte az MDR AB-44 által fertőzött egerek túlélési arányát (> 80%). Ezenkívül az AbOmpA egyes, nagyobb antigenitású és alacsonyabb toxicitású származékait bioinformatikus és immuninformatikus eszközökkel tervezték. Például egy új, 12 szálból álló immunogén modellt kaptunk az OmpA aminosav-szekvenciáinak módosításával, amelyben a K320 – at és a K322-t alaninnal helyettesítettük, a “NADEEFWN” – t a C-terminálisnál elhelyezkedő “YKYDFDGVNRGTRGTSEEGTL”, a “VVQPGQEAAAPAAAAQ”, és az N-terminális 1-24.helyét eltávolítottuk. Ez az AbOmpA-eredetű antigén képes volt olyan antitestek termelésére, amelyek elpusztítják a Pseudomonas aeruginosa-t és az A. baumannii-t . Egy másik módszer a DNS vakcina kifejlesztése, amely a hatékonyság és a tartósság miatt nagyobb figyelmet kapott. A DNS vakcina jelentősen biztonságos és tolerálható, mivel nem tartalmaz legyengült vagy elhalt kórokozót a gyártás során . Hossein et al. klónozta az AbOmpA gént, és beillesztette egy eukarióta expressziós vektorba pBudCE4.1 hogy megkapja a rekombináns pBudCE4.1–ompA-t. Ezzel a rekombináns plazmiddal történő transzfektálás után a humán dermális fibroblaszt sejtek (HDF) hatékonyan expresszálták az AbOmpA-t . Ezután értékelték a pbudce4.1–ompA immunogén potenciálját egerek modelljében. Az ezzel a vakcinával végzett immunizálás után az IL-2, IL-4, IL-12, IgM, IgG és INF-6 mind drámaian megnőtt a szérumban, és több állat maradt életben a kontrollcsoporthoz képest . Nem szabad azonban figyelmen kívül hagynunk a rekombináns molekulák onkogén potenciálját a gazdaszervezetbe való véletlenszerű integrációja miatt.

monoklonális antitestek (mAbs)

széles körben elfogadott, hogy az antitestek felhasználhatók a mikrobiális fertőzések elleni védekezésre. Az ABOMPA elleni antitestek által indukált passzív immunizálást az MDR és XDR-A. baumannii fertőzések lehetséges terápiás módszerének tekintették . A poliklonális Anti-OmpA szérumokkal végzett kezelés azonban számos elkerülhetetlen hiányosságot mutatott, mint például az immunkomplex túlérzékenység, a specifikus antitestek alacsony tartalma és a fertőző betegségek terjedésének potenciális veszélye . A közelmúltban a monoklonális antitest (mAb) technológia hozzájárul az antibakteriális MAB-k kialakulásához. A poliklonális Anti-OmpA szérumokkal összehasonlítva a MAB-ok több előnnyel rendelkeznek, mint például nagyobb biztonság, jobb homológia és specifikusabb célok . Az OmpA-t célzó mAbs elősegíti a makrofágok megölését A. baumannii 307.30 (AB307.30), kivéve azokat, borított vastag kapszula, különösen XDR-A. baumannii. A bizonyítékok azt mutatták, hogy a MABS kötődése a klinikai izolátumokhoz sokkal gyengébb volt, mint a mABs és az ATCC19606 között. Hogy a kapszula a sejtfalon megakadályozza MABS kötődését XDR-A. baumannii? A K1 kapszula-negatív mutáns törzs (AB307.30) erősen kombinálva Anti-OmpA MAB-kkal, ami arra utal, hogy a kapszula poliszacharidok megvédhetik az OmpA kötőhelyeit . A MABS és az XDR-A. baumannii közötti gyenge kombinációt a továbbiakban meg kell oldani, és a mAbs felhasználható az A. baumannii más konzervált epitópjaihoz is.