Articles

Protoplast Isolasjon

Protoplaster Er celler som har fått sin cellevegg fjernet, vanligvis ved fordøyelse med enzymer. Cellulase enzymer fordøyer cellulosen i plantecellevegger mens pektinase enzymer bryter ned pektinholdende celler sammen. Når celleveggen er fjernet, er den resulterende protoplasten sfærisk i form.Fordøyelsen utføres vanligvis etter inkubering i et osmoticum (en løsning med høyere konsentrasjon enn celleinnholdet som får cellene til å plasmolyse). Dette gjør celleveggene lettere å fordøye. Avfall filtreres og / eller sentrifugeres ut av suspensjonen, og protoplastene sentrifugeres deretter for å danne en pellet. Ved resuspensjon kan protoplastene dyrkes på medier som induserer celledeling og differensiering. Et stort antall planter kan regenereres fra et enkelt eksperiment – et gram potetbladvev kan for eksempel produsere mer enn en million protoplaster.Protoplaster kan isoleres fra en rekke plantevev: blader, stengler, røtter, blomster, støtfangere og jevn pollen. Isolasjons-og kulturmediene som brukes varierer med arten og med vevet som protoplastene ble isolert fra. Protoplaster brukes på en rekke måter for forskning og for planteforbedring. De kan behandles på en rekke måter (elektroporasjon, inkubasjon med bakterier, varmesjokk, høy pH-behandling) for å indusere DEM TIL Å ta OPP DNA. Protoplastene kan deretter dyrkes og planter regenereres. På denne måten kan genmodifiserte planter produseres lettere enn det som er mulig ved bruk av intakte celler / planter.Planter fra fjernt beslektede eller ikke-relaterte arter er ikke i stand til å reprodusere seksuelt som deres genomer / former for reproduksjon etc. er uforenlige. Protoplaster fra urelaterte arter kan smeltes sammen for å produsere planter som kombinerer ønskelige egenskaper som sykdomsresistens, god smak og kaldtoleranse. Fusjon utføres ved bruk av en elektrisk strøm eller ved behandling med kjemikalier som Polyetylenglykol (PEG). Fusjonsprodukter kan velges for på medier som inneholder antibiotika eller herbicider. Disse kan deretter induseres til å danne skudd og røtter og hybridplanter kan testes for ønskelige egenskaper.